Будь-який любитель мікробіології знає, що для культивування якоїсь колонії необхідна відповідна живильне середовище. При цьому у кожної живильного середовища є свої особливості як у приготуванні, так і у використанні. Якщо ж ви вирішили виростити колонію ентеробактерій, тоді вам потрібна буде середовище Ендо. Ось саме цьому середовищі і присвячена стаття.

Що ж це за живильне середовище?

Середовище Ендо використовується для виведення ентеробактерій і має диференційно-діагностичний характер. Чому вона називається саме так? Все дуже просто – вона названа на честь свого першовідкривача – Сігеру Ендо. Це відомий учений-мікробіолог японського походження.

В чому ж особливість цієї середовища?

Ні для кого не секрет, що в мікробіології існує поняття грампозитивних і грамнегативних бактерій. Так от, якщо ви вирішили виростити колонію грамнегативних бактерій, для цього вам буде потрібно середовище, яка буде інгібувати ріст грампозитивних бактерій. З цією функцією легко впорається середовище Ендо. Завдяки своїм селективним властивостям вона перешкоджає розвитку грампозитивних колоній.

Склад середовища

Особливості будь середовища залежать в першу чергу від інгредієнтів. До складу середовища Ендо входять:

• сульфат натрію;
• гідрофосфат натрію;
• мясопептонний агар;
• фуксин;
• карбонат натрію;
• лактоза.

Завдяки своїй дешевизні в приготуванні середовище Ендо користується широким попитом серед мікробіологів-любителів.

Який же принцип дії середовища?

Сульфід натрію і фуксин, присутні в її складі, сприяє утворенню реактиву Шиффа. Тобто сульфід натрію буде знебарвлювати фуксин. У результаті цієї реакції утворюється фуксинсернистая кислота.

Всім відомо, що колонії ентеробактерій здатні зброджувати лактозу, в ході цієї реакції утворюється мурашина кислота. З курсу хімії відомо, що мурашина кислота взаємодіє з альдегідами і дає якісну реакцію. Завдяки цьому колонії ентеробактерій будуть забарвлюватися в рожево-малиновий колір. Інші грампозитивні бактерії (крім ентеробактерій) не можуть зброджувати лактозу, тому і забарвлюватися вони не будуть.

У підсумку на чашці Петрі із середовищем Ендо, яка має рожевий колір, будуть виділятися лише ентеробактерії у вигляді паличок малинового кольору. Всі інші колонії будуть або знищені, або не будуть виділятися на тлі живильного середовища.

Приготування поживного субстрату

У мікробіології середовище Ендо одна з головних поживних середовищ. Щоб приготувати самостійно такий субстрат, вам достатньо слідувати наведений нижче інструкції.

1. Приготування бульйону. Підійде будь-яке м’ясо або кістки із залишками м’яса, необхідно максимально видалити жир і сухожилля. Варимо м’ясо приблизно 20-25 хвилин при 100 градусах. Після охолоджуємо бульйон до застигання крапель жиру.

2. Фільтруємо отриманий бульйон через щільний ватяний фільтр до абсолютної прозорості. Слід зазначити, що фільтрування через марлю небажано, так як є ризик попадання маленьких шматочків м’яса.

3. Зважуємо інші інгредієнти. Нам необхідно скласти суху середовище і приготувати реактив Шиффа. Для цього необхідно зробити:

• пептона 1,3 г;
• лактози 1 г;
• агару 2 г;
• фуксину 0,2 р.

4. Додаємо фуксин в 30 мл води, перемішуємо фуксин з водою. Після чого додаємо концентрований розчин сульфіту натрію до зникнення фуксинового кольору.

5. Випадає осад надлишку фуксинсернистой кислоти, видаляємо цей осад фільтруванням.

6. У гарячий бульйон додаємо суху середу.

7. Чекаємо розчинення і додаємо реактив Шиффа.

8. Отриманий субстрат стерилізуємо близько 30 хвилин при температурі близько 125 градусів.

Результати посівів потрібно тримати близько 5 днів, проте чим довше ви їх потримайте, тим буде наочніше результат колоній бактерій.